EnglishisÍslenska

Member institutions

Search in


ThesisUniversity of Iceland>Verkfræði- og náttúruvísindasvið>Meistaraprófsritgerðir>

Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/1946/3373

Title
is

Bestun aðferða við einangrun og greiningu himnufleka úr þarmaþekju Atlantshafsþorsks (Gadus morhua), með áherslu á alkalískan fosfatasa

Abstract
is

Himnuflekar eru þétt pökkuð svæði innan frumuhimnunnar, rík af kólesteróli og
glýkósphingólípíðum. Rannsóknir á þeim hafa vaxið ört síðustu tvo áratugi, en
samkvæmt okkar bestu vitund, hafa ekki verið framkvæmdar rannsóknir á
himnuflekum úr burstalagi þarmaþekjufruma geislaugga fiska (Actionoerygii) fyrr.
Alkalískur fosfatasi (AP) er vel þekkt merkiensím í burstahimnulagi (e. brush
border membranes; BBM) og er staðbundið í himnuflekum. AP úr Atlantshafsþorski
(Gadus morhua) hefur verið til rannsóknar á rannsóknarstofu okkar um langt skeið
og því vaknaði áhugi okkar á að auðkenna prótein og lípíðsamsetningu slíkra
himnufleka og freista þess að kasta ljósi á náttúrulegt hlutverk þess, sem er óþekkt.
Fyrsta markmið okkar var að einangra og auðkenna BBM og himnufleka úr
þarmaþekjufrumum Atlantshafsþorsks til að staðfesta tilvist þeirra og bera saman við
rannsóknarniðurstöður frá öðum dýrategundum. Til að skilgreina einangrunarferlið,
var notast við virknimælingar á þekktum merkiensímum hvers himnuhluta fyrir sig.
Auk þess var dreifing AP kortlögð með mótefnavefjalitun og virknimælingu.
Próteinmengjafræðilegar upplýsingar fengust með notkun massagreina (MALDI eða
LC-ESI) á trypsinmeltum próteinsýnum sem höfðu áður verið aðgreind með SDS
rafdrætti.
Ólíkar aðferðir sem þörfnuðust bestunar sýndu allar aukningu í magni AP, bæði í
BBM hluta og himnuflekum. Einnig voru framkvæmdar 31P-NMR mælingar á
fosfólípuðum sem gefa hlutfallslegt magn allra fosfólípíða. Þær mælingar gáfu
upplýsingar um hátt fosfatidylkólinhlutfall í BBM, en hins vegar hátt hlutfall
sphingólmýelíns í himnuflekum. Kólesterólmælingar sýndu hátt hlutfall í
himnuflekum m.v. sápuleysanlega hluta BBM himnunnar. Þannig sýndu allar þessar
mælingar öll þekkt einkenni himnufleka, borið saman við aðrar dýrategundir.
Nokkur prótein hafa þegar verið auðkennd í himnuflekunum s.s. amínópeptíðasi N,
beta actin og villin 2. Þannig hefur tilvist þekktra himnuflekapróteina og
frymisgrindarpróteina verið staðfest í himnuflekum úr burstalagi þarmaþekjufrumna
Atlantshafsþorsks (Gadus morhua), sem er af ættkvísl geislaugga (e. ray-finned
fishes). Það hefur ekki verið áður gert, eftir því sem við best vitum, fyrir þann stóra
hóp fisktegunda.

Issued Date
10/10/2008


Artifacts
Name[Sortable]Size[Sortable]Visibility[Sortable]Description[Sortable]Format
Gudjon_Andri_Gylfa... .pdf41.2MBOpen Complete Text PDF View/Open