Vinsamlegast notið þetta auðkenni þegar þið vitnið til verksins eða tengið í það: http://hdl.handle.net/1946/2211
Svokölluð sameindaræktun hefur rutt sér til rúms undanfarin ár sem ný leið til að
framleiða erfðatækniprótein fyrir rannsóknir, lyf og iðnað. ORF Líftækni hf hefur m.a.
þróað nýstárlegt kerfi, Orfeus ™, fyrir framleiðslu á vaxtarþáttum í byggi sem eru m.a.
notaðir í læknisrannsóknir, frumuræktir og lyf. Með bættri erfðatækni, m.a. vali á
öflugum stýrlum, má oft auka tjáningu á erfðatæknipróteininu (e. recombinant protein) í
sameindaræktun en ýmislegt bendir til að hægt sé að auka magn þess enn frekar með
ræktunarstýringu. Rannsóknarspurningar þessa verkefnis eru tvær: Í fyrsta lagi hvort
hægt sé að auka afurð sameindaræktunar með ræktunarstýringu (Tilraun 1), og í öðru
lagi hversu vefjasértækur í tíma og rúmi D-hordein stýrillinn, sem OrfeusTM kerfið nýtir,
er við þessar aðstæður (Tilraun 2). Til að fá svör við þessum spurningum var
erfðatæknibygg, sem framleiðir vaxtarþáttinn G-CSF úr manni, ræktað við mismunandi
útfærslur í vatnsrækt. Kannað var hvort að þrjár mismunandi útfærslur hefðu áhrif á 1)
uppskeru, mælt í fjölda fræja á flatareiningu 2) kynslóðartíma og 3) magn
vaxtarþáttarins á fermeter ræktunarrýmis (Tilraun 1). Vefjasértækni D-hordein stýrilsins
í tíma og rúmi var könnuð með mælingum á magni vaxtarþáttar í mismunandi vefjum
(G-CSF), magni vaxtarþáttar (G-CSF og M-CSF) á fermeter m.t.t. þroska plantna en
einnig hvort hægt væri að greina seytingu vaxtarþáttar (G-CSF) út í næringarlausn
vatnsræktarinnar (Tilraun 2). Niðurstöður benda til þess að næringargjöf út
vaxtartímann auki uppskeru byggs en lengi kynslóðartímann um a.m.k. tvær vikur.
Magn G-CSF mældist mest við 35 daga eftir frjóvgun (Zadok stig ~84), eða áður en fræ
hefur náð fullum þroska. G-CSF fannst í mjög litlu magni í blöðum, rótum og stönglum,
en allt að 26 þúsund sinnum meiri styrkur mældist í fræi sem undirstrikar sterka
vefjasértækni D-hordein stýrilsins. Með þessu verkefni hefur skilningur okkar aukist á sameindaræktun og samspili ræktunaraðstæðna og erfðatækni þar sem gen eru tjáð undir
stjórn D-hordein stýrilsins í byggi.
Skráarnafn | Stærð | Aðgangur | Lýsing | Skráartegund | |
---|---|---|---|---|---|
Adalheidur_Einarsdottir_fixed.pdf | 4.34 MB | Lokaður | Heildartexti |