is Íslenska en English

Lokaverkefni (Bakkalár)

Háskóli Íslands > Verkfræði- og náttúruvísindasvið > B.S. verkefni - Verkfræði- og náttúruvísindasvið >

Vinsamlegast notið þetta auðkenni þegar þið vitnið til verksins eða tengið í það: http://hdl.handle.net/1946/26731

Titill: 
  • Titill er á ensku Functional analysis of mutation in the linker domain of Smad3: Determination of nuclear localization and transcriptional activation potential of Smad3 mutant
Námsstig: 
  • Bakkalár
Útdráttur: 
  • Slagæðagúlpur í ósæð eða ósæðagúlpur er sjúkdómur sem getur auðveldlega haft lífshættulegar afleiðingar. Sjúklingar finna yfirleitt ekki fyrir einkennum og uppgötvast gúlpurinn þá fyrir tilviljun, þegar ósæðin að lokum rofnar eða ef einstaklingar verða fyrir bráðri ósæðarflysjun. Ósæðargúlpur í brjóstholi er algengur í ýmsum bandvefssjúkdómum á borð við Marfans og Ehler-Danlos heilkenni. Einnig virðist sjúkdómurinn ganga í ættum þar sem stökkbreytingar í ýmsum genum hafa fundist í fjölskyldum þar sem ósæðagúlpur í brjóstholi virðist arfgengur. Íslensk Erfðagreining fann nýlega eina slíka stökkbreytingu í íslenskri fjölskyldu og er hún skoðuð nánar í þessu verkefni. Stökkbreytingin er staðsett á tengisvæði (linker domain) á geninu Smad3 sem kóðar fyrir lykilprótein í TGFβ boðleiðinni. Markmið verkefnisins var að framkalla stökkbreytinguna og framkvæma á henni virknipróf sem gefa betri skilning á áhrifum hennar. Til að greina hvort stökkbreytingin hafi áhrif á innflutning próteinsins í kjarna var stökkbreytt Smad3 yfirtjáð í frumum. Annars vegar var mótefnalitun framkvæmd og greind í lagsjá. Hinsvegar voru framkvæmdar tilraunir með luciferasa klöguskjóðu til að kanna umritunarvirkni stökkbreytta Smad3 próteinsins.
    Niðurstöður úr þessum tilraunum leiddu í ljós að stökkbreytingin veldur því að Smad3 ferðast ekki inn í kjarnann líkt og villigerðarpróteinið þegar frumurnar voru örvaðar með TGFβ. Einnig virtist stökkbreytta próteinið ekki geta virkjað umritun á sama hátt og villigerðarpróteinið, bæði í óörvuðum og TGFβ örvuðum frumum.

  • Útdráttur er á ensku

    : Aortic aneurysm is a condition in which the aorta bulges out in an abnormal way. Patients are most often asymptomatic until the aneurysm is diagnosed by accident or they end up suffering from aortic rupture or dissection which is potentially lethal. When the bulge forms in the chest portion of the aorta it is referred to as thoracic aortic aneursym (TAA). TAA is prevalent in some inherited connective tissue disorders such as Marfan syndrome and Ehler-Danlos syndrome and mutations in various genes have been found in families with history of aortic aneurysm. Recently, Decode Genetics found one such mutation in an Icelandic family. The mutation is located in the linker domain of Smad3 gene that encodes an essential protein in the TGFβ signaling pathway.
    The aim of this study was to generate that mutation and perform a functional analysis of the mutant. Overexpression, immunostaining and confocal imaging were used to determine subcellular localization of the protein and a luciferase reporter assay was performed to analyse the transcriptional activation of the mutated Smad3. Results revealed that the mutated Smad3 does not seem to be able to translocate to the nucleus compared to the wt Smad3 when cells are stimulated with TGFβ. The mutant also showed less transcriptional activation downstream of the TGFβ pathway compared to the wt Smad3 both in non-treated and TGFβ treated cells.

Samþykkt: 
  • 26.1.2017
URI: 
  • http://hdl.handle.net/1946/26731


Skrár
Skráarnafn Stærð AðgangurLýsingSkráartegund 
GuðrúnMatthildur_BSc.pdf8.07 MBLokaður til...01.09.2024HeildartextiPDF
Eyðublað_GMS.pdf244.85 kBLokaðurYfirlýsingPDF