is Íslenska en English

Lokaverkefni (Meistara)

Háskóli Íslands > Heilbrigðisvísindasvið > Meistaraprófsritgerðir - Heilbrigðisvísindasvið >

Vinsamlegast notið þetta auðkenni þegar þið vitnið til verksins eða tengið í það: http://hdl.handle.net/1946/15133

Titill: 
  • Titill er á ensku Development of a sample preparation method for the detection and identification of cholesterol in a Parkinson’s disease model utilizing MALDI-MSI
  • Þróun sýnameðhöndlunaraðferðar fyrir greiningu og auðkenningu kólesteróls í Parkinsons-líkani með MALDI-MSI
Námsstig: 
  • Meistara
Útdráttur: 
  • Útdráttur er á ensku

    Background: Findings of an association between cholesterol in the brain and Parkinson’s disease (PD) have called upon further studies. The matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry imaging (MALDI-MSI) technique has been used for visualizing distribution of molecules in diseased-state tissues but has some limitations regarding analysis of cholesterol.
    Objectives: 1) To develop a novel sample preparation method that facilitates analysis of cholesterol’s relative abundance and distribution within the brain tissue using MALDI-MSI and enables on-tissue identification of the molecule. 2) To implement the sample preparation method in a PD-model.
    Methods: Coronal brain tissue sections from control and sham-lesioned rats were used for the development of the sample preparation method. A washing preparation step with ammonium acetate buffer and a derivatization step using betaine aldehyde were evaluated both separately and combined. A unilaterally neurotoxin-lesioned PD-model rat brain was used to estimate the association between cholesterol and PD. A MALDI TOF-TOF mass spectrometer was used.
    Results: The sample preparation method enables the measurements of the relative abundance and distribution of cholesterol within rat brain tissue and its identification with tandem MS (MS/MS). A combination of a washing preparation step and a derivatization step dramatically increased the signal intensity compared with no sample preparation. When performed on a PD-model no difference in relative abundance and distribution of cholesterol was observed between 6-hydroxydopamine (6-OHDA)-lesioned hemisphere and healthy tissue.
    Conclusions: The sample preparation method was successful in increasing the signal intensity and allowing for an enhanced visualization of the relative abundance and distribution of cholesterol within the rat brain tissue using MALDI-MSI. Results from the PD-model suggest that cholesterol levels may not be affected in a 6-OHDA induced rat model of PD.

  • Bakgrunnur: Uppgötvuð tengsl milli kólesteróls í heila og Parkinsonsveiki hafa kallað á frekari rannsóknir. Matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry imaging (MALDI-MSI) tæknin hefur verið notuð til að skoða sameindir í sjúkum vefum en hefur ákveðnar takmarkanir þegar kemur að greiningu á kólesteróli.
    Markmið: 1) Að þróa nýja aðferð fyrir sýnameðhöndlun sem auðveldar greiningu á hlutfallslegu magni og dreifingu kólesteróls í heilavef með notkun MALDI-MSI og gerir auðkenningu sameindarinnar á vef mögulega. 2) Að hagnýta aðferðina í Parkinsons-líkani.
    Aðferðir: Krúnuheilasneiðar úr samanburðar og sham-löskuðum rottum voru notaðar fyrir aðferðarþróunina. Undirbúningsskref sem fólu í sér annars vegar þvott með ammóníumasetat stuðpúða og hins vegar afleiðumyndun með hjálp betaíne aldehýð voru metin bæði sitt í hvoru lagi og sameinuð. Einhliða 6-hydroxydopamine (6-OHDA)-taugaeiturs-laskaðir Parkinsons-líkan rottu heilar voru notaðir til að meta tengsl milli kólesteróls og Parkinsonsveiki. Rannsóknin var framkvæmd með MALDI TOF-TOF massagreini.
    Niðurstöður: Nýja aðferðin var nýtileg til að meta hlutfallslegt magn og dreifingu kólesteróls í heilavef rottu. Samsetning þvottaskrefs og afleiðumyndunar jók merkið verulega samanborið við það að sleppa sýnameðhöndlun. Þegar aðferðin var notuð á Parkinsons-líkan sást enginn munur í hlutfallslegu magni og dreifingu kólesteróls milli vefs sprautuðum með 6-OHDA og heilbrigðs vefs.
    Ályktanir: Sýnameðhöndlunaraðferðin reyndist árangursrík í að auka merkjastyrk og bæta greiningu á hlutfallslegu magni og dreifingu kólesteróls í heilavef rottu með MALDI-MSI. Enginn munur sást á hlutfallslegu magni kólesteróls í Parkinsons-módeli með hjálp aðferðarinnar, sem bendir til þess að eitrun með 6-OHDA hafi ekki áhrif á kólesterólstyrk í Parkinsons-rottumódeli.

Samþykkt: 
  • 17.5.2013
URI: 
  • http://hdl.handle.net/1946/15133


Skrár
Skráarnafn Stærð AðgangurLýsingSkráartegund 
Ingolfur MS ritgerd_lokautgafa.pdf2.99 MBLokaður til...01.01.2024HeildartextiPDF