is Íslenska en English

Lokaverkefni (Bakkalár) Háskóli Íslands > Verkfræði- og náttúruvísindasvið > B.S. verkefni - Verkfræði- og náttúruvísindasvið >

Vinsamlegast notið þetta auðkenni þegar þið vitnið til verksins eða tengið í það: http://hdl.handle.net/1946/17338

Titill: 
  • Titill er á ensku Comparison of phospholipid composition of lipid rafts in rat heart, isolated with two different methods, using detergent or detergent-free high salt solution
  • Samanburður á fosfólípíðasamsetningu himnufleka úr rottuhjarta, sem einangraðir eru með tveim mismunandi aðferðum, byggðum á notkun sápuefnislausnar eða sterkrar saltlausnar án sápu
Námsstig: 
  • Bakkalár
Útdráttur: 
  • Frumuhimna heilkjarna lífvera er gerð úr fosfólípíðum, sfingólípíðum, kólesteróli og himnupróteinum. Himnuflekar eru afmörkuð svæði innan frumuhimnunnar sem innihalda hátt hlutfall kólesteróls og sfingólípíða. Þessi svæði hafa fjölbreytilega líffræðilega virkni, m. a. sem vettvangur fyrir boðflutninga og við innfrumun efna með caveolum, sem eru sérstakt form himnufleka. Himnuflekar voru einangraðir úr rottuhjörtum með notkun annaðhvort sterkrar Na2CO3 lausnar án sápuefna eða með Triton X-100 sápuefnalausn til að leysa himnur utan fleka og spuna á súkrósastigul þar sem himnuflekar settust í léttari hluta hans. Próteinmæling ásamt þerriblettun á flekapróteinum voru notuð til að sýna viðurvist himnufleka. Lípið voru dregin úr himnuflekum með aðferð Folch og fosfólípíð greind með31P-NMR. Fosfólípíðasamsetning himnuflekanna var mismunandi eftir einangrunaraðferðum: Toppar fosfatidýletanólamín-plasmalógens og fosfatidýletanólamíns runnu saman og toppur fosfatidýlseríns greindist ekki í himnuflekum einangruðum með sápuefnalausn, en aðgreining þeirra var góð í himnuflekum einangruðum án sápuefna. Hlutfall cardiolípins og fosfatidýlglýceróls, sem eru fosfólípíð úr hvatberum, var hærra í himnuflekum einangruðum með sápuefnalausn, sem bendir til meiri mengunar frá hvatberahimnum í himnuflekum einangruðum með sápuefnalausn. Aðgreining fosfólípíða-toppa var töluvert betri í himnuflekum einangruðum með sápuefnalausri lausn en þegar sápuefni var notað. Ennfremur bentu mótefnalitun og próteinmæling til þess að einangrun himnuflekanna hafi tekist betur þegar þeir voru einangraðir án sápuefna.

  • Útdráttur er á ensku

    The plasma membrane of eukaryotes is made of phospholipids, sphingolipids, cholesterol and membrane proteins. Lipid rafts are subdomains of the plasma membrane which are rich in cholesterol and sphingolipids. These domains have diverse biological functions, such as serving as platforms for signal transduction pathways and endocytosis by means of caveolae, a class of lipid rafts. Lipid rafts were isolated from rat hearts using a detergent-free, Na2CO3 buffer or 1% Triton X-100 detergent solution to solubilize non-raft membranes, and then samples were centrifuged in a discontinuous sucrose gradient to achieve floating of the lipid rafts into the lighter fractions. Total protein measurements and immunoblots were used to verify the presence of lipid rafts. Lipids were then extracted by the method of Folch and the phospholipids were analyzed by 31P-NMR spectroscopy. It was not possible to distinguish between phosphatidylethanolamine, phosphatidyl-ethanolamine plasmalogen and phosphatidylserine in the sample isolated with the detergent method. The mitochondrial phospholipids cardiolipin and phosphatidylglycerol were found in higher percent amounts in the detergent isolated samples than detergent-free, which could indicate more contamination from mitochondrial membranes in these samples. The phospholipid peak separation was considerably better in the spectra from rafts isolated with the detergent-free method. Furthermore, immunoblots of raft markers and total protein measurements indicated a better isolation of lipid rafts with the detergent-free method.

Samþykkt: 
  • 10.2.2014
URI: 
  • http://hdl.handle.net/1946/17338


Skrár
Skráarnafn Stærð AðgangurLýsingSkráartegund 
BS Ritgerð - Adam Erik Bauer (2).pdf1.67 MBOpinnHeildartextiPDFSkoða/Opna