is Íslenska en English

Lokaverkefni (Meistara)

Háskóli Íslands > Heilbrigðisvísindasvið > Meistaraprófsritgerðir - Heilbrigðisvísindasvið >

Vinsamlegast notið þetta auðkenni þegar þið vitnið til verksins eða tengið í það: http://hdl.handle.net/1946/27045

Titill: 
  • Titill er á ensku Fluorescence labelling of chitosan and its cationic derivatives for biological studies
  • Flúrmerking kítósans og katjóníska kítósanafleiða fyrir líffræðilegar rannsóknir
Námsstig: 
  • Meistara
Útdráttur: 
  • Útdráttur er á ensku

    Chitosan, amino-polysaccharide produced from chitin has demonstrated outstanding biological, physiological and pharmacological properties ranging from mucoadhesion to permeation enhancement and antimicrobial activity. The application of chitosan as a supporting polymer for gene delivery or tissue engineering are only few of numerous exciting utilization of chitosan being investigated.
    On its own, chitosan is insoluble in either organic solvents or aqueous solvents above the pH 6.5 but the free amino group and the two hydroxy groups in the monomers can be chemically modified to prepare derivates with more desirable properties.
    N-alkyl quaternized chitosan derivatives with structural motifs found in antimicrobial peptides had been prepared in our laboratory with the aim to enhance the antimicrobial activity of the polymer and its solubility at physiological pH. The mechanism of antimicrobial action of chitosan and its derivatives has however not been fully described.
    It this study procedures were developed for fluorescence labelling of three chitosan based materials; chitosan, trimethyl chitosan (TMC) and N-(2-(N,N,N-trimethylammoniumyl) acetyl)chitosan (TMAC) with fluorescein isothiocyanate (FITC). The reactions were reliable in giving desired extent of labelling which was not found to alter the activity of the original polymers and the purification steps were sufficient to give pure products.
    The synthetized materials were applied in confocal microscopy visualisation of the interaction between those polymers and one Gram positive bacteria (S.aureus) and one Gram negative bacteria (E.coli) species, which indicated the localisation of the polymers on the outer side of bacteria.
    The uptake mechanism of the chitosan derivatives into MDA-MB-231 metastatic breast carcinoma cells was also investigated. The results showed that FITC-TMC and FITC-TMAC were located on the cell surface as well as in the perinuclear region of the cells. Both were seen in clusters resembling vacuoles.

  • Kítósan, amínófjölsykra sem er framleidd úr kítini hefur sýnt framúrskarandi líffræðilegan, lífeðlisfræðilegan og lyfjafræðilegan eiginleika sem nær frá slímhimnu viðloðandi eiginleikum og gegndræpisaukandi áhrifum til örverudrepandi eiginleika. Notkun kítósanfjölliða við vefjaverkfræði og til þess að ferja gen eru aðeins ein af fjölmörgum spennandi nýtingu kítosans sem hefur verið rannsakað.
    Kítósan eitt og sér er óleysanlegt í bæði lífrænum leysum eða vatnslausnum yfir pH 6,5 en amínóhópurinn og hýdroxýhóparnir tveir í einliðunni geta verið breytt með efnafræðilegum hætti til þess að undirbúa afleiður með æskilegri eiginleikum.
    N-alkýl fjórgildar kítósanafleiður sem líkjast bakteríudrepandi peptíðum voru smíðaðar með það markmið að auka þeirra örverudrepandi virkni og leysni við lífræðilegt pH. Hins vegar hefur örverudrepandi verkunarmátur kítósans og kítósanafleiða ekki verið lýst.
    Í þessari rannsókn voru þróaðar aðferðir til að tengja flúrljómandi efni (FITC) við kítósan, trímetýl kítósan (TMC) og N-(2-(N,N,N-trímetýlammóníumýl)acetýl)kítósan (TMAC). Efnahvörfin sýndu áreiðanlega niðurstöðu við að ná tilætluðu merkingu sem breytti ekki virkni upprunalegu fjölliðanna og hreinsunar skrefin reyndust færar um að ná hreinum afurðum.
    Smíðaðar flúrljómandi fjölliður voru notuðar við confocal smásjá til þess að ákvarða staðsetningu þeirra í/á eina Gram jákvæða bakteríu (S.aureus) og eina Gram neikvæða bakteríu (E. coli) og reyndust þær staðsettar á ytri hlið bakteríanna.
    Upptaka kítósanafleiða innan MDA-MB-231 frumna var einnig rannsökuð. Niðurstöðurnar sýndu að FITC-TMC og FITC-TMAC voru staðsettar á yfirborði frumnanna sem og í umhverfis kjarna og voru sjáanlegar í þyrpingum sem líktust safabólum.

Samþykkt: 
  • 2.5.2017
URI: 
  • http://hdl.handle.net/1946/27045


Skrár
Skráarnafn Stærð AðgangurLýsingSkráartegund 
MS thesis - Petra.pdf5.71 MBOpinnHeildartextiPDFSkoða/Opna
Skemman - Petra.pdf173.81 kBLokaðurYfirlýsingPDF