is Íslenska en English

Lokaverkefni (Bakkalár)

Háskóli Íslands > Verkfræði- og náttúruvísindasvið > B.S. verkefni - Verkfræði- og náttúruvísindasvið >

Vinsamlegast notið þetta auðkenni þegar þið vitnið til verksins eða tengið í það: http://hdl.handle.net/1946/27637

Titill: 
  • Titill er á ensku Effects of the Vibrio alkaline phosphatase variants D12W and T112A-R113G on its promiscuous activity as sulfatase.
  • Áhrif stökkbreytinganna D12W og T112A-R113G á súlfatasa fjölvirkni alkalísks fosfatasa úr Víbríó.
Námsstig: 
  • Bakkalár
Leiðbeinandi: 
Efnisorð: 
Útdráttur: 
  • Útdráttur er á ensku

    Alkaline phosphatases (APs) are enzymes that work as very efficient catalysts with broad substrate specificity. They are primarily phosphomonesterases and play a fundamental role in many types of biological processes such as basic metabolism and gene expression. APs have ability to perform different activities than its native activity which is called promiscuity and previous experiments have shown that changes in the enzyme can affect the promiscuity.
    In this project the aim was to look at how the T112A-R113G and D12W mutation on the cold-active Vibrio alkaline phosphatase affects its sulfatase promiscuous activity. The D12W variant was studied to see how its kinetic efficiency, with and without NaCl, and heat stability compared with the wild-type (wt). Results indicated that the D12W VAP variant has higher heat stability but lower kinetic values than its wt, which indicates that the variant is less flexible. They also indicated that NaCl affects enzyme catalytic efficiency. Its sulfatase promiscuous activity was practically non-existent and its native activity was very low as well. The T112A-R113G variant had lower phosphatase activity and higher sulfatase activity than its wt, which indicates that concentration of salt in the solution does promote sulfatase activity.

  • Alkalískir fosfatasar (AP) eru ensím sem eru mjög góðir hvatar og breiðvirkir. Þeir eru aðalega fosfómónóesterasar og gegna grundvallarhlutverki í mörgum tegundum líffræðilegra ferla eins og undirstöðu efnaskipta og genatjáningu. AP geta hvatað önnur efnahvörf til viðbótar við upprunalega efnahvarfið. Það er kallað fjölvirkni og fyrri rannsóknir hafa sýnt að breytingar á ensími getur haft áhrif á fjölvirkni þess.
    Í þessu verkefni var skoðað hvernig T112A-R113G og D12W stökkbreytingar á kuldavirka Vibrio alkalíska fosfatasa (VAP) höfðu áhrif á fjölvirkni hans. Gerðar voru tilraunir á D12W afbrigðinu til að sjá hvernig hreyfiorka, með og án NaCl, og hitastöðugleiki þess væri miða við upprunalega ensímið (wt). Niðurstöður benda til þess að D12W VAP afbrigðið hafi meiri hitastöðugleika en minni hreyfiorku en wt sem gefur til kynna að afbrigðið sé minna sveigjanlegt. Þær benda einnig til þess að NaCl hafi áhrif á hvatavirkni ensímsins. Súlfatasa fjölvirkni þess var næstum engin og aðalvirkni þess var einnig mjög lág. T112A-R113G afbrigðið hafði lægri fosfatasa virkni en hærri súlfatasa virkni en wt, sem gefur til kynna að salt styrkur í lausninni hafi áhrif til hææknau á súlfatasa virkni.

Samþykkt: 
  • 23.5.2017
URI: 
  • http://hdl.handle.net/1946/27637


Skrár
Skráarnafn Stærð AðgangurLýsingSkráartegund 
Flóra-BS verkefni.pdf2.45 MBOpinnHeildartextiPDFSkoða/Opna
New Doc 2017-05-22_1.pdf407.61 kBLokaðurYfirlýsingPDF