is Íslenska en English

Lokaverkefni (Meistara)

Háskóli Íslands > Heilbrigðisvísindasvið > Meistaraprófsritgerðir - Heilbrigðisvísindasvið >

Vinsamlegast notið þetta auðkenni þegar þið vitnið til verksins eða tengið í það: http://hdl.handle.net/1946/35098

Titill: 
  • Titill er á ensku Biomarker analysis for APRT deficiency diagnosis using UPLC-MS/MS
  • UPLC-MS/MS magngreining á lífmerkjum og lyfjum fyrir APRT skort
Námsstig: 
  • Meistara
Útdráttur: 
  • Útdráttur er á ensku

    Adenine phosphoribosyltransferase (APRT) deficiency is a rare genetic disorder.
    Since activity of the APRT enzyme is absent, adenine is oxidized and forms
    2,8-dihydroxyadenine (DHA). DHA is insoluble in urine and can precipitate and form
    kidney stones, which can cause acute and chronic kidney failure. The disease can be
    treated with the drugs allopurinol and febuxostat, which prevent the conversion of
    adenine to DHA and thus reduce formation of kidney stones in APRT deficiency
    patients.
    UPLC-MS/MS method for simultaneous quantification of DHA, adenine and the
    drugs, allopurinol, oxypurinol and febuxostat in human plasma had been developed.
    The objective of this study was to perform full validation of the UPLC-MS/MS
    quantification method according to method validation guideline from Food and Drug
    Administration (FDA Bioanalytical Method Validation Guidance for Industry, 2018).
    Following full validation of the UPLC-MS/MS method, plasma samples from patients
    with APRT deficiency will be studied.
    The sample preparation procedure was optimized prior to conductance of full
    validation of the UPLC-MS/MS quantification method. During the validation process,
    the performance of the analytical column changed, shown by a deterioration of
    chromatographic peak shape of the analytes and increased column pressure.
    Therefore, investigation of different batches of analytical columns was conducted and
    the results indicated that column properties changed following analysis of human
    plasma extracts. It was concluded that further investigation of this phenomena is
    needed before conducting the full validation procedure. However, due to COVID-19
    epidemic the laboratory was temporarily closed before the issue could be resolved
    and no further work could be conducted.

  • Adenine phosphoribosyltransferase (APRT) skortur er sjaldgæfur erfðasjúkdómur.
    Þar sem virkni APRT ensímsins er ekki til staðar er adenine umbreytt í
    2,8-dihydroxyadenine (DHA). DHA er torrleyst við sýrustig þvags og getur fallið út og
    myndað nýrnasteina, þetta getur leitt til bráðrar og krónískrar nýrnabilunar. Hægt er
    að meðhöndla sjúkdóminn með lyfjunum allopurinol og febuxostat, sem koma í veg
    fyrir myndun á DHA og draga þannig úr nýmyndun á nýrnasteinum.
    UPLC-MS/MS mæliaðferð fyrir samtímis magngreiningu á DHA, adenine og lyfjunum
    allopurinol, oxypurinol og febuxostat í blóðvökva hefur verið þróuð. Markmið
    verkefnisins var að framkvæma fulla gildingu á þessari mæliaðferð, þar sem stuðst
    verður við verklýsingar um gildingu frá Food and Drug Administration í
    Bandaríkjunum (FDA Bioanalytical Method Validation Guidance for Industry, 2018).
    Þegar að mæliaðferðin hefur verið fullgilduð þá verða blóðvökvasýni frá sjúklingum
    með APRT skort rannsökuð.
    Sýnameðhöndlunin fyrir mæliaðferðina var betrumbætt áður en hefja átti gildinguna.
    Tæknilegir erfileikar varðandi súluna í UPLC-MS/MS tækjabúnaðnum sem
    einkenndust af hækkuðum þrýstingi og minni greiningarsvörun komu upp þegar
    tilraunir fyrir gildingu hófust. Rannsókn á mismunandi súlum var gerð, niðurstöðurnar
    bentu til þess að eiginleikar súlunnar breyttust í kjölfar greiningar á blóðvökvasýnum.
    Það var komist að þeirri niðurstöðu að frekari rannsókn á þessu vandamáli þyrfti að
    framkvæma áður en full gilding á mæliaðferðinni væri framkvæmd. Vegna COVID-19
    faraldursins var rannsóknarstofunni tímabundið lokað áður en hægt var að leysa
    vandamálið.

Samþykkt: 
  • 27.4.2020
URI: 
  • http://hdl.handle.net/1946/35098


Skrár
Skráarnafn Stærð AðgangurLýsingSkráartegund 
MSritgerd_Palmi_27april_pdf.pdf1.18 MBLokaður til...28.04.2025HeildartextiPDF
Yfirlysing_um_medferd_lokaverkefna_Palmi_MS_skemma.pdf122.94 kBLokaðurYfirlýsingPDF