is Íslenska en English

Lokaverkefni (Meistara)

Háskóli Íslands > Verkfræði- og náttúruvísindasvið > Meistaraprófsritgerðir - Verkfræði- og náttúruvísindasvið >

Vinsamlegast notið þetta auðkenni þegar þið vitnið til verksins eða tengið í það: http://hdl.handle.net/1946/35850

Titill: 
  • Titill er á ensku Expression patterns and subcellular localization of Pontin and Reptin
Námsstig: 
  • Meistara
Efnisorð: 
Útdráttur: 
  • Útdráttur er á ensku

    Pontin and Reptin are a pair of highly conserved ATPases that are involved in various cellular mechanisms. Both proteins are found in all eukaryotes where they associate with a variety of multiprotein complexes and are generally thought to function as chaperones in the assembly of these complexes. In this project, different models were used to examine the expression profile, localization, and behavior of Pontin and Reptin in vivo. Drosophila melanogaster was used as a model organism and new strains containing mCherry knock-in tagged Pontin and Reptin were generated to complement existing GFP knock-in tagged Pontin and Reptin strains. Expression profiles were generated during early development using the GFP strains and subcellular localization examined in third instar larval tissues. Both Pontin and Reptin were found to be ubiquitously expressed throughout early development and during larval stages and are most prominent in the nucleus. During cell division, both disassociate from the chromatin and localize to the mitotic spindles. Both Pontin and Reptin form puncta in the cytoplasm of different cell types at different developmental timepoints. The behavior of Pontin and Reptin seems differ in some cell types where, e.g. Pontin will form puncta in the cytoplasm of secretory cells in the salivary gland while Reptin does not. Both proteins have remarkedly stronger expression in male gonads compared to other tissues and both are excluded from the nucleus in gonialblast and spermatogonia. In future experiments, better characterization of Pontin and Reptin, their interaction partners and dynamics in different tissues will be of high interest.

  • Pontin og Reptin eru vel varðveitt prótein sem tilheyra fjölskyldu AAA+ ATPasa og tengjast margskonar frumustarfsemi. Þau finnast í öllum heilkjörnungum og eru talin tengjast samsetningu á stórum próteinflókum sem gegna ólíkum hlutverkum innan frumna. Í þessu verkefni voru mismunandi tól notuð til þess að skoða tjáningu, staðsetningu og hegðun Pontin og Reptin in vivo. Ávaxtaflugan, Drosophila melanogaster, var notuð sem tilraunalífvera. mCherry flúrpróteinmerkjum var skotið inn í erfðamengið framan á bæði Pontin og Reptin með CRISPR tækni, sem viðbót við stofna sem áður höfðu verið myndaðir á sama hátt með GFP merki. Tjáning Pontin og Reptin í gegnum fósturskeið var greind með lifandi smásjárskoðun og innanfrumustaðsetning próteinana skoðuð í vefjum á þriðja lirfustigi. Bæði Pontin og Reptin hafa sterka og almenna tjáningu í flestum frumum og vefjum í fósturþroskun og á lirfustigum, þar sem þau eru hæstum styrk í kjarna. Við frumuskiptingar losna þau bæði frá litni og tengjast mítósuspólum. Bæði Pontin og Reptin mynda doppur í umfrymi í mörgum frumugerðum. Hegðun Pontin og Reptin virðist þó vera ólík í sumum frumugerðum þar sem, t.d. Pontin myndar sterka punkta í umfrymi seytifrumna í munnvatnskirtlum lirfa á meðan Reptin gerir það ekki. Bæði próteinin hafa mjög sterka tjáningu í kynkirtlum karldýra samanborið við aðra vefi og þau eru bæði útilokuð úr kjarna í sæðismyndandi frumum. Í framhald af þessu verkefni væri áhugavert að nýta þá stofna sem myndaðir voru til að skilgreina betur hvaða prótein Pontin og Reptin eiga í samskiptum við og hegðun þeirra í misunandi frumugerðum.

Samþykkt: 
  • 4.6.2020
URI: 
  • http://hdl.handle.net/1946/35850


Skrár
Skráarnafn Stærð AðgangurLýsingSkráartegund 
Yfirlýsing um meðferð lokaverkefnis Arnar Þór Björgvinsson.pdf302.41 kBLokaðurYfirlýsingPDF
MS ritgerð Arnar Þór Björgvinsson.pdf51.81 MBLokaður til...01.06.2035HeildartextiPDF