is Íslenska en English

Lokaverkefni (Meistara)

Háskóli Íslands > Heilbrigðisvísindasvið > Meistaraprófsritgerðir - Heilbrigðisvísindasvið >

Vinsamlegast notið þetta auðkenni þegar þið vitnið til verksins eða tengið í það: https://hdl.handle.net/1946/35922

Titill: 
  • Titill er á ensku The effects of MITF germline mutation on DNA damage response
  • Áhrif MITF kímlínustökkbreytingar á viðbragð frumunnar gegn DNA skemmdum
Námsstig: 
  • Meistara
Útdráttur: 
  • Útdráttur er á ensku

    The MITF transcription factor is a master regulator of melanocytes and an essential factor in melanocyte proliferation and melanin production. MITF’s significance in melanoma progression is well-known, and a specific germline mutation, E318K, increases the chances of developing melanoma and renal carcinoma.
    There are strong indications that MITF participates in the regulation of the DNA damage response, mainly through cell cycle checkpoints and DNA repair. The DNA damage response is a complex network with multiple pathways that prevent the accumulation of DNA damage. The DNA damage checkpoints are the foundations of this network and are crucial in signaling the presence of DNA lesions and mediating their repair.
    This study aimed to characterize the role of the MITF E318K germline mutation in the context of cell cycle regulation and DNA repair. A research model was generated that involved using four siRNA resistant MITF expression plasmids (MITF-M wildtype, MITF-A wildtype, MITF-M E318K, and MITF-A E318K) to perform rescue experiments in cell lines where endogenous MITF was silenced with siRNA and MITF expression re-introduced with a MITF expression plasmid.
    This study is incomplete due to limiting factors, with the outbreak of Covid-19 being the most prominent. Key experiments with the MITF E318K mutation were not performed, and therefore valuable information was not obtained, which could have been of significance. Nevertheless, the work and generation of a research model for this study was important and could prove useful for an ongoing study in the Sigurdsson lab. Further research is needed, which is likely to prove of value for further analysis of the MITF E318K mutation.

  • MITF er umritunarþáttur sem er þekktastur fyrir hlutverk sitt í þroskun litfrumna og er lykilþáttur í myndun melaníns. MITF er mjög mikilvægt í framgöngu sortuæxla og kímlínustökkbreytingin, E318K, veldur auknum líkum á myndun sortuæxla og nýrnakrabbameina.
    Sterkar vísbendingar eru fyrir því að samverkun sé á milli MITF og próteina í DNA skemmdarviðbragðinu, meðal annars lykilpróteina í DNA viðgerð og líka próteina sem taka þátt í stjórnun mikilvægra eftirlitsstöðva í frumuhring. DNA skemmdarviðbragðið er umfangsmikið kerfi sem hindrar uppsöfnun DNA skemmda og eru grunnstoðir þessa kerfis eftirlitsstöðvar sem bregðast við skemmdum á DNA sameindinni og miðla svo viðgerð þeirra.
    Megin markmið þessa verkefnis var að rannsaka hugsanlegt hlutverk MITF í viðbragði frumunnar við DNA skemmdum, með áherslu á hvaða hlutverki E318K kímlínustökkbreytingin gegnir í þessu samhengi. Þögglar stökkbreytingar voru myndaðar í fjórum mismunandi MITF tjáningarplasmíðum (MITF-M, MITF-A, MITF-M E318K, og MITF-A E318K) til að gera þau ónæm fyrir bæli RNA sameindum. Þessi plasmíð voru síðan notuð í björgunartilraunir þar sem innræn (endogenous) MITF tjáning var bæld og MITF tjáning endurvakin með MITF tjáningarplasmíði.
    Rannsóknarverkefnið er óklárað vegna takmarkandi þátta þar sem útbreiðsla Covid-19 spilar stórt hlutverk. Tilraunir sem voru ætlaðar til að skoða áhrif MITF E318K stökkbreytingarinnar voru ekki framkvæmdar og því fengust ekki mikilvægar niðurstöður. Þrátt fyrir það var vinnan sem fór í þetta verkefni og uppsetning rannsóknarlíkans engu að síður mikilvæg og mun styðja við rannsókn sem er í gangi á rannsóknarstofu Stefán Sigurðssonar. Frekari rannsókna er þó þörf og áframhaldandi rannsóknir á MITF E318K kímlínustökkbreytingunni nauðsynlegar.

Samþykkt: 
  • 5.6.2020
URI: 
  • http://hdl.handle.net/1946/35922


Skrár
Skráarnafn Stærð AðgangurLýsingSkráartegund 
MSc thesis_MFS.pdf6.98 MBOpinnHeildartextiPDFSkoða/Opna
Yfirlýsing-MFS.pdf216.72 kBOpinnYfirlýsingPDFSkoða/Opna