is Íslenska en English

Lokaverkefni (Meistara)

Háskóli Íslands > Heilbrigðisvísindasvið > Meistaraprófsritgerðir - Heilbrigðisvísindasvið >

Vinsamlegast notið þetta auðkenni þegar þið vitnið til verksins eða tengið í það: https://hdl.handle.net/1946/40667

Titill: 
  • Titill er á ensku Tazarotene in the treatment of hand osteoarthritis (Development of an in vitro model)
Námsstig: 
  • Meistara
Efnisorð: 
Útdráttur: 
  • Útdráttur er á ensku

    Currently, no disease-modifying drugs are available for hand osteoarthritis (HOA). HOA is a heterogenous disease with known genetic risk loci and genetic association studies implicate the retinoic acid pathway in the development of HOA. Tazarotene, a third-generation retinoid, may thus have therapeutic use for the disease. However, challenges in the drug development for HOA today is testing for drug response. Since no specific model for HOA exists, various animals have been used for research. However, they cannot adequately predict human drug response and are hard to ethically justify.
    The aims of this study included the development of an in vitro HOA model to test tazarotene and determine its 50% cytotoxic concentration (CC50), and examining tazarotene’s effect on different markers of the disease.
    A lactate-dehydrogenase cytotoxicity assay was performed to determine the CC50 of tazarotene. Primary chondrocytes from healthy and HOA patients, as well as interleukin-1β induced differentiated mesenchymal stem cells, were subjected to different concentrations of tazarotene and analysed for changes in several biomarkers via enzyme-linked immunosorbent assay. Additionally, a glycosaminoglycan assay and histological staining was performed to assess extracellular matrix component synthesis.
    Tazarotene’s CC50 was determined and a simple and efficient method for the transportation and isolation of primary chondrocytes was developed. Tazarotene significantly reduced levels of tumour necrosis factor-α (TNF-α), and signs that the drug may be causing chondrocyte de-differentiation were found. Preliminary data for the development of an in vitro HOA model was collected and the first steps in mimicking TNF-α and glycosaminoglycan levels seen in HOA cell culture achieved.
    At this stage, it is not yet clear if tazarotene exhibits disease-modifying qualities, however, its reduction of TNF-α levels provides an indication that the drug may have a useful therapeutic effect in HOA.

  • Enn sem komið er hafa engin sjúkdómsbreytandi lyf verið þróuð við handaslitgigt. Handslitgigt er misleitur sjúkdómur með sterk erfðafræðileg tengsl og hafa rannsóknir á erfðatengslum sýnt fram á mikilvægi retínósýru í handaslitgigt. Tazaróten sem er þriðju kynslóðar retínóíði, er því talinn geta haft lækningalega virkni gegn sjúkdómnum. Helstu áskoranir við þróun nýrra lyfja við handaslitgigt í dag eru prófanir þeirra fyrir lyfjasvörun. Ýmis tilraunadýr hafa verið notuð í lyfjarannsóknum, þar sem ekkert sjúkdómslíkan fyrir handaslitgigt er til. Auk þess að vera siðferðilega erfið að réttlæta, geta lyfjarannsóknir á dýrum ekki spáð nægilega vel fyrir um lyfjaviðbrögð í mönnum.
    Markmið rannsóknarinnar var tvíþætt, annars vegar að þróa in vitro handaslitgigtarlíkan til að prófa tazaróten og ákvarða 50% frumudrepandi styrk þess (CC50), og hinsvegar að kanna áhrif tazarótens á mismunandi lífmerki sjúkdómsins.
    Laktat-dehýdrógenasa próf var framkvæmt til að ákvarða CC50 tazarótens. Brjóskfrumur úr höndum heilbrigðra og úr handaslitgigtasjúklingum sem og IL-1β örvaðar sérhæfðar mesenchymal stofnfrumur, voru útsettar fyrir mismunandi styrk tazarótens og greindar með tilliti til breytinga á ýmsum lífmerkjum með ensímtengdri mótefnaprófun. Að auki var glýkósamínóglýkan próf og vefjafræðileg litun framkvæmd til að meta nýmyndun utanfrumu efna.
    CC50 tazarótens var fundinn og einföld og skilvirk aðferð til að flytja og einangra brjóskfrumur þróuð. Marktæk lækkun á TNF-α styrk sást með notkun tazarótens, og merki um að lyfið valdi af-sérhæfingu á brjóskfrumum. Frumrannsóknargögnum fyrir þróun á in vitro handaslitgigtarlíkani var safnað og fyrstu skrefum til að líkja eftir TNF-α og glýkósamínóglýkan styrk í handaslitgigtarfrumurækt var náð.
    Á þessu stigi er ekki enn ljóst hvort tazaróten sýnir sjúkdómsbreytandi eiginleika, hins vegar gefur lækkun þess á TNF-α gildum að minnsta kosti vísbendingu um að lyfið gæti haft gagnleg áhrif á handaslitgigt.

Samþykkt: 
  • 25.4.2022
URI: 
  • http://hdl.handle.net/1946/40667


Skrár
Skráarnafn Stærð AðgangurLýsingSkráartegund 
Msc-ritgerd_HH 22.04.2022.pdf6.27 MBLokaður til...22.04.2032HeildartextiPDF
LOKAVERKEFNI.pdf267.38 kBLokaðurYfirlýsingPDF